
液相色譜儀基線問題該怎么處理?液相色譜儀在使用中難免會遇到各種問題,作為實驗室中的實驗人員,自然是需要掌握應對各種情況的知識的,今天來說一下液相色譜儀經常出現的基線問題,那么液相色譜儀基線問題該怎么處理?下面就給大家詳細介紹一下。
故障描述:儀器運行后,檢測器基線長時間漂移,不能平衡,有時候噪音很大。
故障原因及解決方法:首先,檢查泵壓是否穩定。若泵壓不穩,單向閥內可能有異物或氣泡;預柱、色譜柱、手動進樣器、在線過濾片或者管路堵塞。
解決方法:將單向閥拆下用超聲波清洗,根據樣品分析時使用的不同流動相(如有機溶劑、無機溶劑、含鹽溶劑),可以判斷選擇清洗液。清洗完單向閥并重新裝上后,為防止在單向閥內產生氣泡,可以先用甲醇做流動相趕一下氣泡,再根據分析時使用的不同流動相選擇不同的置換液(注意:在置換甲醇時不要把氣泡帶入管路中);更換色譜柱或者用阻尼管代替色譜柱,看壓力有無變化,判斷色譜柱是否堵塞。另外判斷其他部分是否堵塞,可以通過用一段外接管路將其短路連接的方法,觀察短接后泵壓力的變化,判斷手動進樣器、預柱等是否堵塞(用緩沖鹽做流動相時,因鹽分會在管路中析出,在使用前和使用后都要用純水清洗流路,絕對禁止將緩沖溶液留在流路中靜置過夜或更長時間)。檢查完成后,泵的原因即可排除。
其次,檢查流動相內是否有雜質。在停泵或者使用空氣池(將流通池內的鏡片和池墊片拆下,流通池內充滿干燥的空氣)時觀察基線變化,若基線穩定,則說明流動相中有雜質(或者是因為氘燈能量不穩定造成的,后面會講到)。流動相溶劑應選擇HPLC的溶劑或以此為標準的溶劑,流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣,清除微粒和灰塵。檢查流動相和流路,排查原因后,去除流動相內的雜質。
第三,檢查檢測器的氘燈能量是否穩定;流通池內是否有氣泡;流通池鏡片是否臟;儀器所在的環境是否有強的空氣流;室溫變化是否過大;是否使用雙波長模式。
解決方法:在停泵或者使用空氣池的情況下觀察氘燈能量是否穩定。若樣品池與參比池能量不穩定,則必須更換氘燈;觀察流通池內是否有氣泡,可以使用異丙醇或甲醇(使用注射器注射,從流通池進口緩緩推入)清洗流通池內部,排除氣泡。流通池的出口處連接的是一根0.3mm I.D.×2m的背壓管(增加背壓,防止氣泡產生),檢查背壓管是否完好或者增加背壓設備;拆除流通池然后清洗池透鏡(流通池構造如圖1所示),如果無法去除污漬,請安裝新的池透鏡(安裝池透鏡片時需注意,鏡片下面一定要先放置池墊圈,否則會導致鏡片被壓碎);觀察室內環境是否符合液相色譜的實驗室環境要求,改變儀器的位置,或防止所在環境有過多的變化;雙波長模式中的噪音振幅是單波長模式中的10倍以上。小量的波長更改會使流動相吸光度發生非常大的更改。吸光度變化越大,噪音也就越大。更改波長,使其每單位波長的變化對吸光度產生的變化最小。通過這三步檢查,故障即可排除。
以上就是解決液相色譜儀基線問題的方法,我們在使用時如果遇到這類情況一定要按照解決方法一步一步解決,這樣才能不影響實驗的進程。如需繼續了解液相色譜儀相關消息或者更多相關資訊,歡迎閱讀《液相色譜儀用不好怎么辦,掌握這些知識點就能輕車熟路[行業熱搜]》。