
液相色譜儀操作有哪些需要注意的點?在我們的實驗室中,有很多實驗用的儀器,液相色譜儀就是其中之一,而我們的實驗室儀器的操作都是非常準確的,有很多注意事項的,那么液相色譜儀操作有哪些需要注意的點?下面就帶大家一起來了解一下。
液相色譜儀使用注意事項:
使用后不及時清洗泵
流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。
因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。
梯度洗脫的流動相選擇不當
要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶,超出范圍后就不互溶,使用時更要引起注意。
當有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。
忽略的空白梯度洗脫
梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現(xiàn)性。進行樣品分析前必須進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質(zhì)峰,因為弱溶劑中的雜質(zhì)富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需徹底脫氣,以防止混合時產(chǎn)生氣泡。