
液相色譜儀采樣流程有哪些,液相色譜儀作為一種精密的分析儀器,在化學、生物、醫藥等多個領域有著廣泛的應用。其采樣流程是一個嚴謹而復雜的過程,從前期的準備工作到最后的收尾處理,每一個環節都至關重要,今天天恒就帶大家來了解液相色譜儀采樣流程有哪些。
液相色譜儀的采樣流程首先需要進行前期的準備工作。這包括流動相的準備和樣品的處理。流動相是液相色譜分離的關鍵,需要根據實驗需求選擇合適的溶劑,如甲醇、乙腈、水等,并添加相應的添加劑,如緩沖鹽等。在選擇溶劑時,需考慮溶劑的極性、粘度以及與檢測器的兼容性。將流動相用合適的濾膜(常用孔徑為0.20μm或0.45μm)進行過濾,以去除其中的雜質。隨后,對過濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘,以去除溶解在其中的氣體,防止在儀器中形成氣泡影響分析結果。
樣品的處理同樣關鍵。樣品需確保溶解均勻且無雜質。固體樣品需完全溶解在合適的溶劑中,液體樣品則需進行適當的稀釋或前處理。同時,根據樣品的性質和分析目的選擇合適的色譜柱。例如,對于極性較大的樣品,可選擇反相色譜柱(如C18柱);對于極性較小的樣品,正相色譜柱可能更合適。色譜柱的選擇還需考慮其規格(如長度、內徑、粒徑等)對分離效果的影響。
在完成前期準備工作后,接下來是液相色譜儀的開機和初始化。先打開計算機,進入操作系統后,再打開液相色譜儀的各個模塊電源,如泵、檢測器、柱溫箱等。然后雙擊液相色譜儀的工作站軟件圖標,進入軟件操作界面。在系統初始化階段,需沖洗整個液相色譜系統,包括泵、管路、進樣閥、色譜柱和檢測器等。沖洗時間一般為20-30分鐘,目的是去除系統中的雜質和殘留物質,同時檢查系統是否存在漏液等問題。
設置柱溫也是初始化階段的重要步驟。根據實驗要求,在柱溫箱上設置合適的溫度,使色譜柱達到穩定的工作溫度。柱溫的設置需考慮色譜柱的類型、樣品的性質以及分析方法的要求。基線穩定是系統初始化的另一個重要指標。在沖洗過程中,需觀察檢測器的信號,等待基線穩定。基線穩定的標準通常是基線的波動在一定范圍內,且在一段時間內保持相對穩定。這可能需要30分鐘或更長時間,具體取決于儀器的狀態和分析方法。
完成系統初始化后,接下來是方法設置。方法設置包括泵參數設置、檢測器參數設置以及其他相關參數設置。泵參數設置需設置流動相的流速、比例等參數。如果是梯度洗脫,還需設置梯度程序,即不同時間點流動相的組成變化。檢測器參數設置需設置檢測波長、帶寬、響應時間等參數。根據樣品的特性和分析目的選擇合適的檢測波長,以獲得最佳的檢測效果。其他參數設置可根據實驗需求進行設置,如柱溫箱的溫度控制程序、數據采集的頻率等。