液相色譜儀中流動相如何進行調配,做好這些事半功倍[實用知識]
液相色譜儀中流動相如何進行調配?液相色譜儀是我們實驗中常用的一種儀器,在使用它時是需要一定的知識儲備的,如果沒有這些知識儲備,在很多時候都會一籌莫展,特別是在調配流動相的時候,那么液相色譜儀中流動相如何進行調配?下面就給大家詳細介紹一下。
流動相的配制與使用
1.恒度洗脫
一定是將水相與有機相混合后、抽濾(使用混合型過濾膜),用一個管路(如A管)泵入儀器,這是使用的原則。切勿因節約有機相、便于摸索色譜條件等原因而使用兩個管路(一個純水相、一個純有機相)泵入儀器,即便配制了脫氣機。因此種情形極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。
剩余流動相完全可繼續使用,密封后放置陰涼處;待下次試驗時與新配制的流動相混合后抽濾即可。無需擔心發霉、無機鹽析出、揮發、比例不準等問題,這些皆為疑神疑鬼的表現。實踐是檢驗真理的唯一標準!實踐吧~
2.梯度洗脫
流動相配制最為科學的方式是:A相為高比例的水相-低比例的有機相、B相為低比例的水相-高比例的有機相(英國藥典幾乎均如此);其次為:A相為高比例的水相-低比例的有機相、B相為純有機相;最不科學的為:A相為純水相、B相為純有機相,如既有質量標準采用了此種方式,建議改為第二種或第一種方式,否則基線漂移嚴重,難以進行穩定的雜質檢測。
梯度洗脫結束后,建議經5分鐘回到初始狀態,再平衡5分鐘后開始下一針測定。這10分鐘的穩定極為關鍵。切勿短時間內回到初始狀態,會對儀器和色譜柱損傷較大。
以上就是液相色譜儀流動相的調配,我們在使用時一定要掌握這些方法,這樣才能在使用過程不會出現什么意外。如需繼續了解液相色譜儀相關消息或者更多相關資訊,歡迎閱讀《液相色譜儀分離效果不好是什么引起的,要解決問題先找到問題[儀器解析]》。