液相色譜儀實驗中如何操作,操作規(guī)范才能確保實驗準(zhǔn)確[使用說明]
液相色譜儀實驗中如何操作?液相色譜儀屬于實驗室中的精密儀器,對于這類儀器,我們在使用時就需要特別注意它的操作規(guī)范,因為稍有不慎就會導(dǎo)致實驗結(jié)果不準(zhǔn)確,那么液相色譜儀實驗中如何操作?下面就帶大家一起來了解一下。
我們在實驗中使用液相色譜儀時,需要注意以下這些:
1.流動相必須用HPLC級的試劑,使用前過濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細(xì)的膜過濾)。
2.流動相過濾后要用超聲波脫氣,脫氣后應(yīng)該恢復(fù)到室溫后使用。
3.不能用純乙腈作為流動相,這樣會使單向閥粘住而導(dǎo)致泵不進(jìn)液。
4.使用緩沖溶液時,做完樣品后應(yīng)立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時,然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上,以充分洗去離子。對于柱塞桿外部,做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。
5.長時間不用儀器,應(yīng)該將柱子取下用堵頭封好保存,注意不能用純水保存柱子,而應(yīng)該用有機相(如,甲醇等),因為,純水易長霉。
6.每次做完樣品后應(yīng)該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。
7.C18柱絕對不能進(jìn)蛋白樣品,血樣、生物樣品。
8.堵塞導(dǎo)致壓力太大,按預(yù)柱→混合器中的過濾器→管路過濾器→單向閥檢查并清洗,清洗方法:
①以異丙醇作溶劑沖洗;
②放在異丙醇中間用超聲波清洗;
③用10%稀硝酸清洗;
9.氣泡會致使壓力不穩(wěn),重現(xiàn)性差,所以在使用過程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。
10.如果進(jìn)液管內(nèi)不進(jìn)液體時,要使用注射器吸液:通常在輸液前要進(jìn)行流動相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范圍,不得注射強酸強堿的樣品,特別是堿性樣品。
12.更換流動相時應(yīng)該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動邊靖洗,然后插入新的流動相中。更換無互溶性的流動相時要用異丙醇過渡一下。
以上就是我們使用液相色譜儀時需要注意的一些注意事項,我們在實驗中一定要多加注意,只有這樣才能讓實驗順利進(jìn)行,養(yǎng)成良好的實驗習(xí)慣是很重要的。如需繼續(xù)了解液相色譜儀相關(guān)消息或者更多相關(guān)資訊,歡迎閱讀《液相色譜儀會被哪些因素干擾試驗進(jìn)程,排除干擾刻不容緩[解決方法]》。
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