哪些化學因素會影響色譜柱的性能,做好防護才能用的更好[行業熱點]
哪些化學因素會影響色譜柱的性能?色譜柱是我們實驗室常用的一種產品,但是它很容易受到外界影響,所以我們要想要用好色譜柱,就要會排除色譜柱的干擾,那么哪些化學因素會影響色譜柱的性能?下面就給大家詳細介紹一下。
影響色譜柱性能的化學因素
(1)鍵合類型及鍵合相
鍵合相分子與基體單點相連為單體鍵合,這種鍵合方式可以提高傳質速率,縮短柱平衡時間,;聚合體鍵合為鍵合相分子與基體多點相連,這種鍵合方式可以增加色譜柱穩定性,增加載樣量。而鍵合相不同會直接影響化合物的保留行為。
(2)碳覆蓋率
高碳覆蓋率可以提高分辨率和重現性,但分析時間長。
(3)封端
硅膠鍵合相填料中有部分未封端的殘留硅羥基,如圖封端可以減輕待測組分與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應,改善保留和峰行,這對于堿性化合物尤其重要。而不同的封端技術也會直接影響色譜柱的效能。
建立新化合物分離分析方法的色譜柱選擇
根據目標分析物的分子量大小、溶解性、Pka值,以及分離要求、儀器、成本等各方面來選擇色譜柱。
(1)根據分離目的選色譜柱,對映體分離常選擇手性柱,離子化色譜可選擇離子柱,蛋白多肽、DNA可選擇凝膠柱或離子交換柱,一般的小分子化合物可選擇普通反相柱,如C18、C8柱、苯基柱等等。
(2)根據實際需求和設備選擇填料粒徑,普通HPLC一般選擇5μm或3.5μm粒徑的色譜柱,而UPLC則常使用1.7μm——3.5μm的色譜柱。
(3)比表面積,高比表面積有助于分離,低比表面積更適合梯度洗脫程序。
(4)孔徑,大分子化合物適合大孔徑,在保證比表面積的前提下,選擇孔徑大的。
以上就是色譜柱一些干擾因素,這類化學干擾我們平時很難注意到,所以要在了解之后才能做到排除化學干擾,這也是對于實驗室工作人員的基本要求。如需繼續了解色譜柱相關消息或者更多相關資訊,歡迎閱讀《色譜柱為什么不能直接用純水沖洗,色譜柱維護保養做法[今日熱點]》。